Wenn es ums Lagern gehtHefestehen einige gängige Methoden zur Auswahl. Hier sind sechs spezifische Möglichkeiten, Hefe aufzubewahren, jede mit ihren eigenen spezifischen Schritten und Vorsichtsmaßnahmen:

1. 1. Lagerung im Gefrierschrank:

Schritt:

• 1. Glycerin-Kryokonservierungslösung vorbereiten: Steriles Glycerin zum sterilen Medium hinzufügen, normalerweise in einem Verhältnis von 20-40 %. gut gemischt.

2.Übertragen Sie die Hefekultur in ein steriles Zentrifugenröhrchen.

3. Fügen Sie ausreichend Glycerin-Gefrierlösung hinzu, um die Hefekultur zu bedecken.

4. Vorsichtig mischen, um sicherzustellen, dass das Glycerin gleichmäßig verteilt ist.

5.Verschließen Sie die Zentrifugenröhrchen mit cryo-tube Sealern.

6. Zentrifugenröhrchen schnell auf -80 °C oder niedriger einfrieren.

Vorsichtsmaßnahmen:

• *Verwenden Sie aseptische Techniken und Geräte, um eine Kontamination zu verhindern.

*Wählen Sie die richtigen Kryoröhrchen und Gefriergeräte, um ein schnelles Einfrieren und konstant niedrige Temperaturen zu gewährleisten.

*Lagern Sie die Kryoröhrchen vor dem Auftauen in einem Gefrierschrank mit konstanter Temperatur (80 °C).

2.Trockene Lagerung:

Schritt:

1. Hefe bis zur logarithmischen Wachstumsphase kultivieren.

2.Schaben Sie die Hefe gleichmäßig mit einem sterilen, mit sterilem Wasser vorgekühlten Glasstab ab.

3. Geben Sie die ausgekratzte Hefe aseptisch in eine sterile Petrischale oder ein Becherglas.

4. Stellen Sie die Petrischale oder das Becherglas in einem Abzug oder Trockenraum unter belüfteten Bedingungen auf, damit die Hefe auf natürliche Weise trocknen kann.

5. Trockenhefe in einen sterilen, luftdichten Behälter umfüllen.

6. Lagern Sie Hefe in Behältern bei niedrigen Temperaturen (normalerweise 4 °C).

Vorsichtsmaßnahmen:

*Stellen Sie sicher, dass die Umgebung im Abzug oder Trockenraum steril ist.

*Vermeiden Sie eine Hefekontamination während des Trocknens.

*Verwenden Sie zur Lagerung sterile Behälter.

1. 3. Lagerung von Glasrohren:

Schritt:

1.Sterilisierte Glasröhrchen vorbereiten.

2. Übertragen Sie die Hefekultur in ein steriles Glasröhrchen.

3. Glasröhrchen mit Kochstopfen oder Aluminiumfolie verschließen.

4.Glasröhrchen bei niedriger Temperatur lagern (normalerweise 4 °C).

Vorsichtsmaßnahmen:

*Stellen Sie sicher, dass Glasröhrchen und Verschlüsse steril sind.

*Achten Sie beim Verschließen des Glasröhrchens darauf, dass der Verschluss guten Kontakt zum Glasröhrchen hat, um eine Kontamination zu verhindern.

1. 4.Langfristige Medienspeicherung:

Schritt:

1. Bereiten Sie spezielle Langzeitmedien vor, die geeignete Schutzmittel und Nährstoffe enthalten.

2. Übertragen Sie die Hefekultur auf ein Langzeitmedium.

3. Aliquotieren Sie das Medium unter Verwendung aseptischer Technik in sterile Zentrifugenröhrchen oder Flaschen.

4. Lagern Sie Medien in Zentrifugenröhrchen oder Flaschen bei niedriger Temperatur (normalerweise 4 °C).

Vorsichtsmaßnahmen:

*Bei der Vorbereitung von Langzeitmedien achten Sie darauf, aseptische Techniken und sterile Reagenzien zu verwenden.

*Überprüfen Sie vor der Lagerung den pH-Wert und die Sterilität des Mediums.

1. 5. Einfrieren von flüssigem Stickstoff:

Schritt:

1. Bereiten Sie flüssigen Stickstoff und eine spezielle Kryoschutzlösung vor.

2. Mischen Sie die Hefekultur mit einer geeigneten Menge Kryoschutzmittel.

3. Um die Mischung schnell einzufrieren, tauchen Sie sie in flüssigen Stickstoff.

4. Übertragen Sie gefrorene Proben in Lagertanks für flüssigen Stickstoff.

Vorsichtsmaßnahmen:

*Beim Umgang mit flüssigem Stickstoff müssen entsprechende Sicherheitsvorkehrungen getroffen werden, einschließlich des Tragens von Schutzhandschuhen und Schutzbrillen.

*Die Verwendung einer speziellen Kryoschutzlösung gewährleistet das Überleben der Hefe bei extrem niedrigen Temperaturen.

1. 6.Subkultur:

Schritt:

1.Übertragen Sie regelmäßig (normalerweise alle 1-2 Wochen) einen Teil der Hefekultur in neues Medium.

2. Hefe in neuem Medium bis zur logarithmischen Phase wachsen lassen.

3. Wiederholen Sie die oben genannten Schritte.

Vorsichtsmaßnahmen:

*Passagenhefe erhält regelmäßig ihre Vitalität und Gesundheit.

*Achten Sie bei der Passage darauf, sterile Techniken und sterile Medien zu verwenden.

Wählen Sie die Lagermethode, die Ihrem Labor oder Ihren individuellen Anforderungen entspricht, und befolgen Sie die oben beschriebenen Schritte. Diese Methoden können Ihnen helfen, Ihre Hefe langfristig zu konservieren und ihre Kraft und Reinheit zu bewahren.