Quando si tratta di conservarelievito, ci sono alcuni metodi comuni tra cui scegliere. Ecco sei modi specifici per conservare il lievito, ciascuno con i propri passaggi e precauzioni specifici:

1. 1.Conservazione nel congelatore:

Passaggio:

• 1.Preparare la soluzione di crioconservazione di glicerolo: aggiungere glicerolo sterile al terreno sterile, solitamente in un rapporto del 20-40%. ben miscelato.

2.Trasferire la coltura di lievito in una provetta da centrifuga sterile.

3.Aggiungere una quantità di soluzione congelante di glicerolo sufficiente a coprire la coltura del lievito.

4.Mescolare delicatamente per assicurarsi che la glicerina sia distribuita uniformemente.

5. Sigillare le provette da centrifuga con sigillanti cryo-tube.

6.Congelare rapidamente le provette da centrifuga a -80 °C o meno.

Precauzioni:

• *Utilizzare tecniche e attrezzature asettiche per prevenire la contaminazione.

*Scegliere le crioprovette e le apparecchiature di congelamento giuste per garantire un congelamento rapido e temperature basse costanti.

*Conservare le criovial in un congelatore a temperatura costante -80 °C prima di scongelarle.

2. Stoccaggio a secco:

Passaggio:

1. Coltivare il lievito in fase di crescita logaritmica.

2.Raschiare uniformemente il lievito con una bacchetta di vetro sterile preraffreddata con acqua sterile.

3. Posizionare asetticamente il lievito raschiato in una capsula Petri o un bicchiere sterile.

4.In una cappa aspirante o in una stanza di essiccazione, posizionare la capsula Petri o il bicchiere in condizioni ventilate per consentire al lievito di asciugarsi naturalmente.

5.Trasferire il lievito secco in un contenitore ermetico sterile.

6.Conservare il lievito in contenitori a basse temperature (solitamente 4°C).

Precauzioni:

*Assicurarsi che l'ambiente nella cappa chimica o nella stanza asciutta sia sterile.

*Evitare la contaminazione del lievito durante l'essiccazione.

*Utilizzare contenitori sterili per la conservazione.

1. 3. Conservazione del tubo di vetro:

Passaggio:

1.Preparare provette di vetro sterili.

2.Trasferire la coltura di lievito in una provetta di vetro sterile.

3.Chiudere le provette di vetro con tappi per ebollizione o fogli di alluminio.

4.Conservare le provette di vetro a bassa temperatura (tipicamente 4 °C).

Precauzioni:

*Assicurarsi che le provette e le chiusure di vetro siano sterili.

*Quando si chiude il tubo di vetro, assicurarsi che la chiusura sia in buon contatto con il tubo di vetro per evitare contaminazioni.

1. 4.Archiviazione multimediale a lungo termine:

Passaggio:

1.Preparare terreni specializzati a lungo termine contenenti protettivi e nutrienti adeguati.

2.Trasferire la coltura del lievito nel terreno a lungo termine.

3.Aliquotare il terreno in provette o flaconi da centrifuga sterili utilizzando una tecnica asettica.

4.Conservare i terreni in provette o flaconi da centrifuga a bassa temperatura (solitamente 4°C).

Precauzioni:

*Quando si preparano terreni a lungo termine, assicurarsi di utilizzare una tecnica asettica e reagenti sterili.

*Controllare il pH e la sterilità del terreno prima della conservazione.

1. 5.Congelamento con azoto liquido:

Passaggio:

1.Preparare azoto liquido e una soluzione crioprotettore speciale.

2.Mescolare la coltura di lievito con una quantità adeguata di crioprotettore.

3. Per congelare rapidamente la miscela, immergerla in azoto liquido.

4.Trasferire i campioni congelati nei serbatoi di stoccaggio dell'azoto liquido.

Precauzioni:

*Quando si maneggia l'azoto liquido, è necessario adottare adeguate precauzioni di sicurezza, incluso indossare guanti e occhiali protettivi.

*L'uso di una speciale soluzione crioprotettore garantisce la sopravvivenza del lievito a temperature estremamente basse.

1. 6.Sottocultura:

Passaggio:

1. Trasferire periodicamente (di solito ogni 1-2 settimane) una porzione della coltura di lievito in un nuovo terreno.

2. Coltivare il lievito in fase logaritmica in un nuovo terreno.

3.Ripetere i passaggi precedenti.

Precauzioni:

*Il passaggio del lievito mantiene regolarmente la sua vitalità e salute.

*Durante il passaggio, assicurarsi di utilizzare tecniche sterili e terreni sterili.

Scegli il metodo di conservazione adatto al tuo laboratorio o alle tue esigenze individuali e segui i passaggi sopra descritti. Questi metodi possono aiutarti a preservare il tuo lievito a lungo termine e a mantenerne vigore e purezza.